Как подготовить субстрат к инокуляции споровой культурой в домашних условиях? Один из первых вопросов который встает перед начинающим культиватором.
В этой статье мы поэтапно опишем и покажем как это сделать, на примере наиболее простого и удобного зернового субстрата — овса.
О разных субстратах, их свойствах и значении можно прочитать в этой статье.
Почему именно овес? На наш взгляд это наиболее оптимальный вариант при выборе из зерновых злаковых культур. Важно подчеркнуть, что овес обязательно должен быть нешелушеным (другие названия — нешлифованный, неочищенный от шелухи). Такой овес используется в медицинских целях, для проращивания, отваров и настоек.
При покупке обратите внимание на то, чтобы зерно было светлым, плотным и чистым. Если зерно мелкое, то возможно оно пересушено. Если зерно темное или серое, то скорее всего оно поражено грибком или плесенью. И конечно зерно должно быть сухим с нейтральным запахом.
По питательности овес не уступает пшенице и ячменю, гораздо питательнее сенно-соломенных субстратов и удобен в приготовлении. Замечательным его свойством есть то, что его не нужно варить. В силу строения самого зерна оно отлично впитывает влагу при замачивании и удерживает ее смягчая плотную сердцевину зерна.
Замачивание.
1 литр (не килограмм) овса нужно замочить в холодной воде и тщательно перемешать. Воды должно быть больше по объему, чтобы она вся не впиталась после того как овес набухнет. Посуду с замоченным овсом нужно накрыть крышкой и поставить в прохладное место (например в холодильник) на 24 часа.
Это делается для того, чтобы споры конкурентной микрофлоры (плесеней, бактерий) их “сухого”, спящего состояния перешли в состояние вегетативное, ожили и начали свое развитие. Вода всегда способствует этому. После чего мы сразу убиваем их температурной обработкой, стерилизацией в скороварке.
По прошествии суток вы можете заметить, что основная масса зерна опустилась на дно, а сверху плавает мусор, некачественные зерна и шелуха. Их нужно собрать и выкинуть. После чего слить воду.
Промывка.
Как все злаковые, овес в своем составе имеет клейковину, глютен. При замачивании это вещество выделяется в виде слизи. Если на этом этапе зерно не промыть, то впоследствии оно может слипнутся. Так же это белковое соединение будет способствовать развитию кислых бактерий, если они выживут после стерилизации. Потому, чтобы свести к минимуму эти риски мы тщательно промываем зерно. Для этого мы пользуемся обычным душем.
После этой несложной процедуры мы ставим дуршлаг под небольшим углом примерно на 30-40 минут, для того чтобы стекла лишняя вода. Как только это происходит, зерно готово к загрузке в банки.
Банки с фильтром и инокуляционным портом.
Это важная часть. Банки в которых будет происходить колонизация субстрата мицелием это стерильная среда! Туда не должны проникнуть никакие микроорганизмы кроме спор грибов. Все они являются конкурентами спор в борьбе за питательный субстрат.
Важно понимать что споры многих плесеней постоянно находятся в жилом, воздушном пространстве нашего обитания. Вы часто замечали как на продуктах питания со временем селится зеленая плесень Триходерма или как черная плесень Аспергилл появляется во влажных местах санузла. Потому что плесень везде и всегда! 200 миллионов лет назад она научилась выживать в любых условиях: в радиации, арктических льдах и открытом космосе. И она хочет жить и питаться вашим субстратом который вы приготовили для мицелия! По этой причине ваши банки должны быть как крепость, в которую войти могут только молекулы воздуха необходимые для развития мицелия.
Чтобы это получилось крышки банок должны герметично прилегать или закручиваться. Мы используем пищевую, полипропиленовую тару объемом 0.35 — 0.5л. Это оптимальный объем для колонизации. В больших банках мицелий часто может остановиться в росте только потому, что в нижние слои субстрата плохо поступает воздух. Потому лучше приготовить много небольших банок чем несколько больших. Если какая-то заразится плесенью, то это будет одна из многих. Такие банки легкие и удобные. Крышки на них закрываются достаточно плотно. При несильном нажатии вы услышите щелчок, это значит крышка вошла в паз.
В крышке раскаленным шилом нужно сделать отверстие диаметром 3 максимум 5 мм. Больше не нужно. Это отверстие служит портом через который в банку поступает воздух. Также благодаря ему при стерилизации в скороварке уравнивается давление и банки не лопаются (или не срываются крышки).
Важным элементом является фильтр который фиксируется на этом отверстии. Он также должен прилегать герметично. В качестве фильтра очень удобно использовать медицинский пластырь на тканевой основе. Советуем покупать качественный и влагостойкий.
Наши крышки оборудованы инокуляционным портом. Его задача заключается в том, чтобы игла шприца при инокуляции не оставляла открытого отверстия. Резиновая крышка в силу своих свойств отлично справляется с этой задачей. Её просто нужно посадить на герметик в заранее подготовленное отверстие нужного диаметра.
Если вы будете использовать стеклянные банки с металлическими закручивающимися крышками, то фильтр и инокуляционный порт делается точно также, но с учетом материала крышки. Отверстия придется сверлить.
Перед тем как ставить банки в скороварку нужно накрыть крышки пищевой алюминиевой фольгой. Это делается для того, чтобы фильтр не намокал в скороварке при стерилизации. Он конечно намокнет и под фольгой в среде горячего пара, но не так сильно как без нее.
Зачем нужна скороварка? Можно ли заменить ее кастрюлей или духовкой?
Скороварка (или автоклав) необходимы для того, чтобы под воздействием высокой температуры погибли конкуренты наших спор, а именно споры плесеней, бактерий и прочей микроскопической живности которая потом не даст развиваться мицелию. Но разве не проще и дешевле использовать например духовку? Ведь ее можно раскочегарить до 600С.
И тут небольшой экскурс в физику.
Все дело в том, что при обычном атмосферном давлении вода закипает при 100С. Большей температуры не будет, дальше вода превращается в пар. И даже если нагреть духовку до 600С, вода которая находится в субстрате будет кипеть все равно при 100С. Соответственно температура в субстрате не поднимется выше 100С. Выше станет только когда вода выкипит вся. Но сухой субстрат нам не нужен. Но разве 100С недостаточно, спросите вы. Как показывает опыт, к сожалению нет. Для гибели многих микроорганизмов нужна температура выше 100С. Вот почему мы используем скороварку.
Принцип работы скороварки заключается в том, что в ее закрытом пространстве вследствие накопления горячего пара образуется повышенное давление. При таком давлении вода закипает при температуре почти 120С. И такой температуры воды и пара достаточно, чтобы уничтожить все живое в нашем субстрате. И потому мы загружаем наши банки в скороварку.
Стерилизация.
Пластиковые банки нужно поставить на какую то металлическую подставку типа кухонной (под сковороду) и разместить их так, чтобы они не соприкасались со стенками скороварки.
Стеклянные банки можно просто поставить на полотенце на дне. Дальше можно закрывать скороварку соответственно ее конструкции.
Существует много видов скороварок, но все они действуют по одному принципу и обладают примерно одинаковым функционалом. Важно чтобы все детали были на месте.
Крышка должна плотно закрываться и фиксироваться. Для этого обязательно на ней должна быть резиновая или силиконовая круглая прокладка.
В комплекте должен быть грузик, который ставится на рабочий клапан для стравливания избыточного давления, без него ваша скороварка превращается в обычную кастрюлю.
И вообще, скороварка должна быть без повреждений и деформаций. Перед использованием важно проверить рабочий клапан, воздух через него должен проходить свободно. Также на крышке есть второй, аварийный клапан, он срабатывает если рабочий по какой-то причине не работает. Он оборудован пружиной и тоже должен подниматься при вашем незначительном усилии.
Важно понимать, если эти клапаны перекрыты и горячий пар не находит выхода, то ваша скороварка превращается в бомбу!
После того как вы проверили клапана и зафиксировали крышку, скороварку нужно поставить на сильный огонь, чтобы вода закипела. Когда это произойдет, пар начнет с сильным шипением выходить через ваш рабочий клапан поднимая грузик. Вам нужно так отрегулировать огонь на плите, чтобы клапан стравливал пар с краткими перерывами, небольшими порциями. Обычно для этого нужен совсем небольшой огонь.
В этом видео вы можете посмотреть как это происходит.
В таком режиме субстрат проходит стерилизацию от 60 до 120 минут. Так как субстраты бывают разной степени контаминации мы рекомендуем не менее 90 минут.
Подготовка к инокуляции.
По прошествии этого времени вы ни в коем случае не открываете сразу скороварку, это опасно! Внутри горячий пар под давлением. Также мы не рекомендуем охлаждать ее в холодной воде. Во-первых это так же опасно, во вторых при таком экстренном охлаждении скороварка усиленно всасывает воздух извне через рабочий клапан, а вместе с ним все микроорганизмы. Вам нужно дать остыть скороварке естественным образом. Обычно это занимает от 4 до 6 часов.
Если вы используете пластиковые банки, то сразу после того как вы их достанете из скороварки, нужно слегка дожать крышки, они попускаются в процессе стерилизации.
Ну вот, ваш субстрат готов к инокуляции споровой взвесью!
Споровые взвеси вы можете приобрести в нашем магазине в этом разделе.
В заключение.
Нужно отметить что существует альтернативный способ стерилизации субстрата. Это тиндализация. Но данный способ сродни лотерее, может получиться, а может и нет. К тому же это долгий процесс. Скороварка же дает 99% гарантии того, что ваш субстрат действительно стерилен.
Также некоторые культиваторы используют антибиотики при подготовке субстрата. Таблетированный препарат Левомицетин измельчается в порошок и добавляется в воду на этапе замачивания или варки. В теории препарат должен убить микроорганизмы бактериального ряда. Способ считается рабочим, но имеет свои недостатки. Действие левомицетина сказывается на скорости колонизации мицелием субстрата в прямой зависимости, чем больше препарата, тем медленнее растет мицелий. И действует ли левомицетин на споры плесеней неизвестно.
Мы надеемся что эта статья оказалась вам полезна и дополнила ваши знания о культивации грибов. Если вам нужно больше информации, мы приглашаем вас в наш телеграм-чат посвященный этим вопросам. В нем общаются как опытные гроверы так и новички. Там вы всегда сможете задать интересующий вас вопрос и получить помощь.
Удачного грова!