В данной публикации мы даем сокращенный вариант статьи бакалавра Миннесотской лаборатории судебно-медицинской экспертизы Сьюзен Т. Гросс.
АНОТАЦИЯ:
Рассматриваются вопросы выявления психоактивных веществ в грибах. На стадии развития грибов можно идентифицировать психоактивные препараты псилоцин и псилоцибин.
Чтобы ответить на эти вопросы грибы вида Psilocybe выращивали из их спор в контролируемых условиях.
На разных этапах их развития брали образцы и анализировали их на наличие псилоцина и псилоцибина. Знание того на какой стадии развития можно идентифицировать психоактивные вещества может быть полезным для правоохранительных органов, судебных химиков, медицинской практики и микологических опытов.
Методы
Споры использованные в этом эксперименте были получены легально из-за рекламы в журнале High Times Magazine от Psylocybe Fanaticus (PFTek, Сиэтл, Вашингтон). Споры были получены в 10 мл шприцах, в водном растворе. Растворы спор были исследованы с помощью микроскопа с увеличением 12503.
Инструкции по приготовлению среды для выращивания были получены вместе со спорами.
Метанольные экстракты различных образцов были проанализированы с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ) и газовой хроматографии/масс-спектрометрии (ГХ/ТС).
Последующие этапы выращивания опытных образцов по технологии PFTek подробно описаны в оригинальной статье Сьюзен Т. Гросс. по ссылке.
На фото 5 стадий развития грибов. Все стадии были исследованы на предмет наличия психоактивных веществ псилоцин и псилоцибин.
Водный раствор спор рассмотренный с помощью микроскопа с увеличением 12503. Споры являются первой стадией жизненного цикла гриба. Для инокуляции каждой банки объемом 1⁄2 пинты был использован один миллилитр раствора спор.
Мицелий гриба в жидкой питательной среде. Вторая стадия жизненного цикла гриба.
Вегетативная часть гриба называется мицелием. Это вторая стадия жизненного цикла гриба. Первые признаки роста мицелия на субстрате появляются через 4–6 дней после инокуляции.
Третья стадия жизненного цикла гриба – это гифы, которые называют узелками мицелия. Узелки мицелия – это начальное плодовое тело, которое образуется, когда мицелий слипается вместе и, кажется, образует узел.
Четвертая стадия – примордия, на которой начинает формироваться ножка и шляпка гриба.
Пятый этап жизненного цикла гриба – это зрелое плодовое тело. Грибы считаются зрелыми когда они способны рассеивать споры и начинать жизненный цикл снова.
Далее в статье поэтапно, с техническими подробностями, описана процедура анализа и идентификации образцов выращенных в этом проекте. А именно, в спорах, мицелии, мицеллиарных узлах (гифах), примордиях, и плодовых телах зрелых грибов с помощью специального оборудования методом хроматографии. По ссылке.
Результаты исследований.
Анализ спор.
Исходные растворы спор анализировали с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ) и газовой хроматографии/масс-спектрометрии (ГХ/МС). Ни в одном из растворов спор не было обнаружено ни псилоцина ни псилоцибина.
Анализ мицелия.
Рост мицелия наблюдался от 4 до 6 дней. Длительность наблюдения от 24 до 48 дней. Образцы мицелия были взяты после 13 дней роста, 20 дней роста и при разных условиях. Было проанализировано всего 29 образцов белого мицелия. Ни в одном из этих 29 образцов не было обнаружено псилоцина или псилоцибина. Девять из 29 образцов были подтверждены с помощью ГХ/ТС, и опять же, псилоцин не был обнаружен.
Анализ мицелиальных узлов (гифы).
Образцы анализировали после первого признака роста мицелиальных узлов. В общей сложности 22 образца были проанализированы методом ТСХ.
Из 22 образцов в 17 было обнаружено содержание псилоцина. Из этих 17 образцов в 8 также.
22 образцы мицелиальных узлов также анализировали методом ГБ/ТС.
Из этих 22 образцов мицелиальных узлов в 12 было обнаружено содержание псилоцина. В семи образцах был обнаружен псилоцин, и в трех образцах псилоцин не был обнаружен.
Анализ примордий.
Образцы анализировали после наблюдения первых примордий.
В общей сложности 25 примордий были проанализированы методом ТСХ.
Во всех 25 образцах было обнаружено содержание псилоцина. Из этих 25 образцов в 3 было обнаружено содержание псилоцибина.
25 образцов примордий также анализировали методом ГБ/ТС.
Из этих 25 образцов в 19 было обнаружено содержание псилоцина.
Анализ зрелых грибов.
Образцы зрелого гриба также анализировали. Одиннадцать образцов анализировали методами ТСХ и ГХ/ТС.
Все одиннадцать образцов указывали на содержание псилоцина и псилоцибина.
ТАБЛИЦА 1 – Результаты тонкослойной хроматографии (ТСХ).
ТАБЛИЦА 2 – Результаты газового хроматографа/масс-спектрометра (ГХ/МС).
Вывод.
Психоактивные вещества псилоцин и псилоцибин не были обнаружены в спорах и в мицелии – самых ранних стадиях развития гриба.
Эти вещества были идентифицированы в гифах и примордиях – самых ранних стадиях плодового тела гриба.
Также в полной мере эти вещества были идентифицированы в зрелых грибах.
Ссылки на материалы, использованные для статьи, указаны в Референсах в конце статьи.
АВТОР:
Сьюзен Т. Гросс. бакалавр.
Миннесотская лаборатория судебно-медицинской экспертизы.
1246 Юниверсити Авеню.
Сент-Пол, Миннесота 55104