У даній публікації ми надаємо скорочений варіант статті бакалавра Міннесотської лабораторії судово-медичної експертизи Сьюзен Т. Гросс.
АНОТАЦІЯ:
Розглядаються питання щодо виявлення психоактивних речовин у грибах. На якій стадії розвитку грибів можна ідентифікувати психоактивні препарати псилоцин та псилоцибін.
Щоб відповісти на ці питання, гриби виду Psilocybe вирощували з їхніх спор у контрольованих умовах.
На різних етапах їхнього розвитку брали зразки та аналізували їх на наявність псилоцину та псилоцибіну. Знання того на якій стадії розвитку можна ідентифікувати психоактивні речовини може бути корисним для правоохоронних органів, судових хіміків, медичної практики та мікологічних дослідів.
Методи
Спори використані в цьому експерименті були отримані легально через рекламу в журналі High Times Magazine від Psylocybe Fanaticus (PFTek, Сіетл, Вашингтон). Спори були отримані у 10 мл шприцах, у водному розчині. Розчини спор були переглянуті за допомогою мікроскопа зі збільшенням 12503.
Інструкції з приготування середовища для вирощування були отримані разом зі спорами.
Метанольні екстракти різних зразків були проаналізовані за допомогою тонкошарової хроматографії (ТШХ) та газової хроматографії/мас-спектрометрії (ГХ/МС).
Подальші етапи вирощування дослідних зразків за технологією PFTek детально описані у орігінальній статті Сьюзен Т. Гросс. за посиланням.
На фото 5 стадій розвитку грибів. Всі стадії були досліджені на предмет наявності психоактивних речовин псилоцин та псилоцибін.
Водний розчин спор розглянутий за допомогою мікроскопа зі збільшенням 12503. Спори є першою стадією життєвого циклу гриба. Для інокуляції кожної банки об’ємом 1⁄2 пінти було використано один мілілітр розчину спор.
Міцелій гриба у рідкому поживному середовищі. Друга стадія життєвого циклу гриба.
Вегетативна частина гриба називається міцелієм. Це друга стадія життєвого циклу гриба. Перші ознаки росту міцелію на субстраті з’являються через 4–6 днів після інокуляції.
Третя стадія життєвого циклу гриба – це гіфи, які називають «вузликами міцелію». Вузлики міцелію – це початкове плодове тіло яке утворюється коли міцелій злипається разом і здається утворює «вузол».
Четверта стадія – примордії, на якій починає формуватися ніжка і капелюшок гриба.
П’ятий етап життєвого циклу гриба – це зрілий плід. Гриби вважаються зрілими коли вони здатні розсіювати спори та починати життєвий цикл знову.
Далі у статті поетапно, з технічними подробицями описана процедура аналізу та ідентифікації зразків вирощених у цьому проекті. А саме, у спорах, міцелію, міцеліарних вузлах (гіфах), примордіях, та плодових тілах зрілих грибів за допомогою спеціального обладнання методом хроматографії. За посиланням.
Результати досліджень.
Аналіз спор.
Вихідні розчини спор аналізували за допомогою тонкошарової хроматографії (ТШХ) та газової хроматографії/мас-спектрометрії (ГХ/МС). У жодному з розчинів спор не було виявлено ні псилоцину ні псилоцибіну.
Аналіз міцелію.
Ріст міцелію спостерігався від 4 до 6 днів. Загальна тривалість спостереження від 24 до 48 днів. Зразки міцелію були взяті після 13 днів росту, 20 днів росту та за різних умов. Було проаналізовано загалом 29 зразків білого міцелію. У жодному з цих 29 зразків не було виявлено псилоцину чи псилоцибіну. Дев’ять із 29 зразків були підтверджені за допомогою ГХ/МС, і знову ж таки, псилоцину не було виявлено.
Аналіз міцеліальних вузлів (гіфи).
Зразки аналізували після першої ознаки росту міцеліальних вузлів. Загалом 22 зразки були проаналізовані методом ТШХ.
З 22 зразків у 17 було виявлено вміст псилоцину. З цих 17 зразків у 8 також.
22 зразки міцеліальних вузлів також аналізували методом ГХ/МС.
З цих 22 зразків міцеліальних вузлів у 12 було виявлено вміст псилоцину. У семи зразках було виявлено псилоцин, і в трьох зразках псилоцин не був виявлений.
Аналіз примордій.
Зразки аналізували після спостереження перших примордій.
Загалом 25 примордій були проаналізовані методом ТШХ.
В усіх 25 зразків було виявлено вміст псилоцину. З цих 25 зразків у 3 було виявлено вміст псилоцибіну.
25 зразків примордій також аналізували методом ГХ/МС.
З цих 25 зразків у 19 було виявлено вміст псилоцину.
Аналіз зрілих грибів.
Зразки зрілого гриба також аналізували. Одинадцять зразків аналізували методами ТШХ та ГХ/МС.
Усі одинадцять зразків вказували на вмст псилоцину та псилоцибіну.
ТАБЛИЦЯ 1 – Результати тонкошарової хроматографії (ТШХ).
ТАБЛИЦЯ 2 – Результати газового хроматографа/мас-спектрометра (ГХ/МС).
Висновок.
Психоактивні речовини псилоцин і псилоцибін не були виявлені у спорах і в міцелії – найраніших стадіях розвитку гриба.
Ці речовини були ідентифіковані в гіфах та примордіях – найраніших стадіях плодового тіла гриба.
Також у повній мірі ці речовини були ідентифіковані в зрілих грибах.
Посилання на матеріали які були використані для статті вказані у Референсах у кінці статті
АВТОР:
Сьюзен Т. Гросс. бакалавр.
Міннесотська лабораторія судово-медичної експертизи.
1246 Юніверсіті Авеню.
Сент-Пол, Міннесота 55104